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1.1.1儀器
kou罩細菌過(guò)濾效率(BFE)檢測儀、高壓蒸汽滅菌器、電子天平、生化培養箱、超凈工作臺、菌落計數儀。
1.1.2試劑及材料
蒸餾水、75%消毒酒精、胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA)、胰蛋白胨大豆肉湯培養基(TSB)、蛋白胨、酒精燈、90mm培養皿、500mL錐形瓶。
細菌懸浮液制備
培養基配置
取500mL錐形瓶,按照要求精確稱(chēng)取一定量的TSA培養基,加入合適比例的蒸餾水,包扎后放入高壓蒸汽滅菌器,121°C滅菌15min,滅菌結束后取出,待其冷卻至約50°C時(shí),將培養基逐個(gè)倒入無(wú)菌培養皿中,操作應在超凈工作臺中進(jìn)行,以酒精燈的火焰周?chē)鳛闊o(wú)菌區域,避免雜菌污染,每個(gè)培養皿中應倒入約27mL培養基。
無(wú)菌確認
待培養基冷卻凝固后,將其倒置放入恒溫培養箱中,37°C條件下培養24h,將有菌落生長(cháng)的培養皿舍棄不用,無(wú)雜菌生長(cháng)的取出備用。
細菌懸浮液制備
挑取一環(huán)金黃色葡萄球菌ATCC6538接種在適量胰蛋白胨大豆肉湯培養基中,在(37±2)°C振蕩培養(24±2)h,然后用1.5%的蛋白胨將上述培養物稀釋至約5×105cfu/ml。
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